Chiral AAOA 手性柱使用說明

·色譜柱信息

Chiral AAOA 手性柱是以高純度具有良好機(jī)械穩(wěn)定性的硅膠為基質(zhì)，通過鍵合 D-青霉胺于十八烷基柱上而成的配體交換型手性柱。

該系列手性柱專屬用于手性拆分脂肪族，芳香族的α型有機(jī)酸、α型非衍生氨基酸及其衍生物、二元胺、二肽、內(nèi)酰胺、氨基醇等。

 

·色譜柱安裝與操作注意

新的 Chiral AAOA 系列手性柱保存在 5%異丙醇：95%的 2mM 硫酸銅水溶液中。使用前務(wù)必用流動相完全清洗管路后，再接色譜柱沖洗平衡 1 小時(shí)以上再進(jìn)樣。

該系列手性柱的推薦流動相為 2mM 的硫酸銅水溶液：異丙醇=95:5(V/V)。流動相中異丙醇的比例不能超過 15%，過大比例會導(dǎo)致色譜柱的損壞。

 

·樣品與流動相

為了避免色譜柱的堵塞，所有樣品和溶劑，都必須在使用前用 0.45 ?m 或 0.22 ?m 的濾膜過濾。

建議可采用保護(hù)柱套（FCG-6000）和保護(hù)柱芯（FCG-6287）以攔截污染物和意外的鹽析。

流動相中任何時(shí)候不能含有無機(jī)酸，無機(jī)堿，不可用不含銅離子的鹽，否則將損壞色譜柱。

流動相一定要采用預(yù)混合方式走等度，在線混合方式將損壞色譜柱。樣品一定要用水或流動相溶解。

流動相中硫酸銅的濃度發(fā)生變化時(shí)或體系發(fā)生變化時(shí)，色譜柱要重新平衡 2 小時(shí)以上。

 

方法開法過程中的建議（按程序進(jìn)行）

1. 異丙醇比例可向下調(diào)節(jié)至 0（將增加保留時(shí)間，分離度可能提升）或向上調(diào)節(jié)至最大 15%（將減小保留時(shí)間，分離度可能降低）；

2. 可用乙腈（最高比例不超過15%）或甲醇（最高比例不超過30%）取代流動相中的有機(jī)成份異丙醇；

3. 溫度可調(diào)節(jié)的范圍為5-60 ℃；

4. 硫酸銅的濃度控制在 0.5mM 至 4mM 之間，一般使用為 2mM。注意隨著鹽濃度的增加，有機(jī)相的最高比例限會降低；

5. 可用0.5mM 醋酸銅+0.1M 的醋酸銨水溶液體系直接取代硫酸銅與異丙醇體系（pH 也可通過用醋酸或氨水調(diào)整在 4.5-7 之間）；

色譜柱的保養(yǎng)

pH 避免在pH 低于 4.0 或高于 7.0 的條件下使用色譜柱。請盡量使用pH 在 4.5‐7.0 范圍內(nèi)的流動相。

壓力 操作壓力要低于200 bar(或20MPa 或 2900Psi)。

溫度 最高操作溫度為60 ?C。盡量在50 ?C 以下使用。色譜柱必須在柱溫箱嚴(yán)格控溫下操作。

儲藏 每日用完時(shí)，務(wù)必用 5%異丙醇：95%的 2mM 硫酸銅水溶液以 0.5ml/min 流速沖洗 2 小時(shí)以上，并直接常溫保存。如果色譜柱長期不用，每隔 6 個月，需要用此流動相重新沖洗 2 小時(shí)以上再保存。