以下是一份詳細(xì)的紫外分光光度計(jì)使用指南:
### 一、開(kāi)機(jī)與預(yù)熱
1. **打開(kāi)樣品室蓋**:檢查樣品室中是否放置有遮光物,若有則取出。 2. **打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)**:儀器進(jìn)入預(yù)熱狀態(tài),預(yù)熱時(shí)間通常為20至30分鐘,具體根據(jù)儀器型號(hào)和說(shuō)明書(shū)而定。預(yù)熱是為了確保儀器穩(wěn)定,提高測(cè)量準(zhǔn)確性。
### 二、選擇光源與波長(zhǎng)
1. **選擇光源**:對(duì)于紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì),若需要在紫外光區(qū)(200nm\~290nm)工作,則需將光源切換至氘燈;若需要在紫外光區(qū)(290nm\~360nm)或可見(jiàn)光區(qū)工作,則可能需要同時(shí)點(diǎn)亮氘燈和鎢燈(或僅點(diǎn)亮鎢燈)。 2. **選擇波長(zhǎng)**:調(diào)節(jié)波長(zhǎng)旋鈕或輸入實(shí)驗(yàn)所需的波長(zhǎng),選擇所需的單色光波長(zhǎng)。
### 三、校準(zhǔn)與調(diào)零
1. **校準(zhǔn)**:目前型號(hào)較新的分光光度計(jì)具有開(kāi)機(jī)自動(dòng)校準(zhǔn)功能。若無(wú)自動(dòng)校準(zhǔn)功能,則需在使用前參照使用說(shuō)明書(shū)進(jìn)行手動(dòng)校準(zhǔn)。 2. **調(diào)零**:在參比樣品池內(nèi)放入?yún)⒈葮悠罚ㄍǔ檎麴s水或空白溶液),進(jìn)行調(diào)零操作,使吸光度讀數(shù)為0.000A。若讀數(shù)不為0,則需重復(fù)調(diào)零操作,直至達(dá)到要求。
### 四、測(cè)量與數(shù)據(jù)處理
1. **測(cè)量**:將待測(cè)樣品倒入比色皿中(液體在池中高度不低于一定標(biāo)準(zhǔn),如3cm),放入樣品池內(nèi),點(diǎn)擊測(cè)試按鈕進(jìn)行測(cè)量。記錄測(cè)試數(shù)據(jù),包括波長(zhǎng)、透射比、吸光度、測(cè)試時(shí)間等。 2. **數(shù)據(jù)處理**:定量測(cè)試時(shí),通常需要先測(cè)定若干個(gè)已知濃度的待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)樣品,根據(jù)其吸光值與濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。目前新型號(hào)的紫外分光光度計(jì)本身具有制作和計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的功能,具體操作方式可參照設(shè)備使用說(shuō)明。不具備標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制功能的設(shè)備,可利用Excel軟件或坐標(biāo)紙輔助繪制。
### 五、關(guān)機(jī)與保養(yǎng)
1. **取出吸收池**:測(cè)量完畢后,取出吸收池,清洗并晾干后入盒保存。 2. **關(guān)閉電源**:關(guān)閉電源,拔下電源插頭。 3. **放入干燥劑**:在樣品室內(nèi)放入干燥劑,蓋上樣品室蓋,罩上防塵罩。
### 六、注意事項(xiàng)與常見(jiàn)問(wèn)題處理
1. **比色皿的使用**:拿比色皿時(shí),手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。清洗比色皿時(shí),一般先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。不能使用堿溶液或氧化性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿,以免損壞。 2. **防止光電管疲勞**:不測(cè)定時(shí)必須將比色皿暗箱蓋打開(kāi),使光路切斷,以延長(zhǎng)光電管使用壽命。 3. **讀數(shù)跳動(dòng)不穩(wěn)定**:可能由儀器受潮、電源線接地不良、供電電源不穩(wěn)定、高溫環(huán)境、儀器附近有陽(yáng)光直射、非預(yù)期的震動(dòng)、使用錯(cuò)誤的比色皿、樣品揮發(fā)性大、光源燈老化、前置放大板損壞、光路被非預(yù)期移動(dòng)等原因?qū)е隆?yīng)針對(duì)具體原因進(jìn)行處理,如延長(zhǎng)預(yù)熱時(shí)間、降低環(huán)境濕度、使電源線安全接地、使用交流穩(wěn)壓電源、改善環(huán)境以適應(yīng)儀器正常使用、使用正確的比色皿、使用比色皿蓋、更換光源燈、修理或更換前置放大板、重新調(diào)試光路等。
### 七、軟件操作(針對(duì)配備軟件的紫外分光光度計(jì))
1. **打開(kāi)軟件**:先打開(kāi)電腦,再打開(kāi)紫外分光光度計(jì)電源,點(diǎn)擊打開(kāi)相應(yīng)的操作軟件。 2. **連接儀器**:點(diǎn)擊軟件中的連接按鈕,等待系統(tǒng)自檢完畢,確保自檢項(xiàng)目全部通過(guò)。 3. **選擇測(cè)定方式**:在軟件中選擇所需的測(cè)定方式,如光度測(cè)定(定量)方式、光譜測(cè)定方式等。 4. **設(shè)置參數(shù)**:根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置參數(shù),如波長(zhǎng)范圍、掃描速度、采樣間隔等。 5. **開(kāi)始測(cè)定**:在參比光束和樣品光束下各放上空白試劑進(jìn)行基線校正后,設(shè)置樣品并點(diǎn)擊開(kāi)始鍵開(kāi)始測(cè)定。 6. **保存與查看數(shù)據(jù)**:測(cè)定完畢后保存當(dāng)前測(cè)試數(shù)據(jù),并可對(duì)已保存數(shù)據(jù)進(jìn)行查看和分析。
請(qǐng)注意,不同型號(hào)的紫外分光光度計(jì)在操作上可能略有差異,因此在使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀儀器說(shuō)明書(shū)并遵循制造商的指示進(jìn)行操作。 |
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