液相色譜柱的裝填步驟通常可以分為干法裝填和濕法裝填(勻漿法)兩種,以下是詳細(xì)的步驟說明:
### 一、干法裝填
1. **準(zhǔn)備填料和柱子**:
* 選擇合適的填料,確保其粒徑適合所需的分離效果。 * 將柱子清洗干凈,并準(zhǔn)備好用于裝填的漏斗等工具。
2. **逐步加料**:
* 將少量填料通過漏斗加入到柱子的頂端。 * 每次加料后,輕輕敲打柱子,使填料在柱內(nèi)均勻分布,避免形成空隙。 * 重復(fù)這個(gè)過程,直到柱子裝滿為止。敲打時(shí)要避免過于劇烈,以免破壞填料的均勻性。
3. **壓實(shí)和修整**:
* 如有條件,將裝好的柱子連接到色譜泵上,以高速高壓使溶劑通過一段時(shí)間,以確保填料緊密排列。 * 拆下柱子后,取下柱子頂端多余的填料,用一小團(tuán)硅烷化的玻璃棉或多孔聚四氟乙烯圓板放置在柱子的頂端并向下壓實(shí),以防止填料在使用過程中松動(dòng)。
### 二、濕法裝填(勻漿法)
1. **準(zhǔn)備填料、勻漿液和柱子**:
* 選擇合適的填料和勻漿液(通常是一種合適的溶劑或混合溶劑)。 * 將柱子清洗干凈,并準(zhǔn)備好勻漿罐、超聲波浴等設(shè)備。
2. **配制勻漿液**:
* 將所需重量的填料置于小燒杯中。 * 按填料的重量加入適量的勻漿液(一般為填料重量的10倍左右),并攪拌均勻。
3. **超聲處理**:
* 將攪拌均勻的填料和勻漿液移至超聲波浴中,以中強(qiáng)的超聲波使填料粒子均勻而穩(wěn)定地懸浮起來。 * 超聲處理的時(shí)間不宜過長(zhǎng),一般不超過2\~3分鐘,以避免顆粒破碎。
4. **裝填柱子**:
* 將清潔的柱管的一端裝配上帶濾板的柱頭,另一端連接至勻漿罐上。 * 將準(zhǔn)備好的勻漿液倒入勻漿罐中,并排除其中的空氣泡。 * 使用氣動(dòng)高壓泵將勻漿液壓入柱管中,同時(shí)保持一定的壓力以確保填料緊密排列。 * 加壓時(shí),勻漿液中的填料會(huì)滯留于柱尾的濾板上,而勻漿液則被排除于柱外。
5. **壓力調(diào)整和靜置**:
* 在加壓過程中,可以根據(jù)需要調(diào)整壓力大小,以確保填料能夠均勻緊密地填充在柱內(nèi)。 * 加壓完成后,降低壓力并靜置一段時(shí)間,讓柱床內(nèi)的壓力平衡。
6. **收尾工作**:
* 拆下已填裝好的柱子,并裝配上帶有篩板(濾網(wǎng))的柱頭。 * 檢查柱子是否密封良好,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)泄漏等問題。
需要注意的是,在裝填液相色譜柱時(shí),要嚴(yán)格控制環(huán)境的溫濕度和所用材料的品質(zhì),以確保裝填質(zhì)量。同時(shí),對(duì)于不同類型的填料和柱子,可能需要采用不同的裝填方法和條件。因此,在實(shí)際操作中,應(yīng)根據(jù)具體情況進(jìn)行調(diào)整和優(yōu)化。 |